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av网站大全 细菌芽孢染色法

发布日期:2024-11-11 23:51    点击次数:179

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执行八 细菌芽孢染色法

 

  一、方向要求

  学习并掌抓芽孢染色法。

  二、基应允趣

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  芽孢染色法是独揽细菌的芽孢和菌体对染料的亲协力不同的旨趣,用不同染料进行着色,使芽孢和菌体呈不同的心理而便于区别。芽孢壁厚、透性低,着色、解除均较贫乏,因此,首先用一弱碱性染料,如孔雀绿(malachite green)或碱性品红(basicfuchsin)在加热要求下进行染色时,此染料不仅不错参加菌体,并且也不错参加芽孢,参加菌体的染料可经水洗解除,而参加芽孢的染料则难以透出,若再用复染液(如番红液)或映衬溶液(如玄色素溶液)处分,则菌体和芽孢易于折柳。

  三、器材

  枯草芽孢杆菌,蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),生孢梭菌(Clostridium sporogenes);

  孔雀绿染液,番红水溶液,苯酚品红溶液,玄色素溶液等。

  四、操作法子

  法子1、

  (1)将培养24小时足下的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌,作涂片、干燥、固定。

  (2)滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。

  (3)用木夹夹住载玻片在火焰上加热,使染液冒蒸汽但勿欢乐,切忌使染液蒸干,必要时可添加极少染液。加热时分从染液冒蒸汽时开动缠绵约4—5分钟。这一步也可不加热,改用挥霍的孔雀绿水溶液(约7.6%)染10分钟。

  (4)倾去染液,待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色适度。

  (5)用番红水溶液复染1分钟,水洗。

  (6)待干燥后,置油镜不雅察,芽孢呈绿色,菌体呈红色。

   法子2、

  (1)取二支洁净的小试管,分别加入0.2ml无菌水,再往一管中加入1—2接种环的蜡状芽孢杆菌的菌苔,另一管中加入1—2接种环的生孢梭菌的菌苔,两管各自充分羼杂成浓厚的菌悬液。

  (2)在菌悬液均分别加入0.2ml苯酚品红溶液,充分羼杂后,于滚水浴中加热3—5分钟。

  (3)用接种环分别取上述羼杂液2—3环于两片载玻片上,涂薄,风干后,将载玻片稍歪斜于烧杯上,用95%酒精冲洗至无红色液流出。

  (4)再用自来水冲洗,滤纸吸干。

  (5)取1—2接种环玄色素溶液于涂片处,立即伸开涂薄,当然干燥后,油镜不雅察,在淡紫灰色配景的映衬下,菌体为白色,菌体内的芽孢为红色。

  五、执行陈说

  1.成果

  画图暗意你不雅察到的两种芽孢杆菌的芽孢在形势、大小、着生位置上有什么不同?

  2.念念考题

  为什么在孔雀绿染色液加热染色中av网站大全,要待玻片冷却后智商用水冲洗?





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