av网站大全 细菌芽孢染色法
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执行八 细菌芽孢染色法
一、方向要求
学习并掌抓芽孢染色法。
二、基应允趣
空姐 偷拍芽孢染色法是独揽细菌的芽孢和菌体对染料的亲协力不同的旨趣,用不同染料进行着色,使芽孢和菌体呈不同的心理而便于区别。芽孢壁厚、透性低,着色、解除均较贫乏,因此,首先用一弱碱性染料,如孔雀绿(malachite green)或碱性品红(basicfuchsin)在加热要求下进行染色时,此染料不仅不错参加菌体,并且也不错参加芽孢,参加菌体的染料可经水洗解除,而参加芽孢的染料则难以透出,若再用复染液(如番红液)或映衬溶液(如玄色素溶液)处分,则菌体和芽孢易于折柳。
三、器材
枯草芽孢杆菌,蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),生孢梭菌(Clostridium sporogenes);
孔雀绿染液,番红水溶液,苯酚品红溶液,玄色素溶液等。
四、操作法子
法子1、
(1)将培养24小时足下的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌,作涂片、干燥、固定。
(2)滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。
(3)用木夹夹住载玻片在火焰上加热,使染液冒蒸汽但勿欢乐,切忌使染液蒸干,必要时可添加极少染液。加热时分从染液冒蒸汽时开动缠绵约4—5分钟。这一步也可不加热,改用挥霍的孔雀绿水溶液(约7.6%)染10分钟。
(4)倾去染液,待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色适度。
(5)用番红水溶液复染1分钟,水洗。
(6)待干燥后,置油镜不雅察,芽孢呈绿色,菌体呈红色。
法子2、
(1)取二支洁净的小试管,分别加入0.2ml无菌水,再往一管中加入1—2接种环的蜡状芽孢杆菌的菌苔,另一管中加入1—2接种环的生孢梭菌的菌苔,两管各自充分羼杂成浓厚的菌悬液。
(2)在菌悬液均分别加入0.2ml苯酚品红溶液,充分羼杂后,于滚水浴中加热3—5分钟。
(3)用接种环分别取上述羼杂液2—3环于两片载玻片上,涂薄,风干后,将载玻片稍歪斜于烧杯上,用95%酒精冲洗至无红色液流出。
(4)再用自来水冲洗,滤纸吸干。
(5)取1—2接种环玄色素溶液于涂片处,立即伸开涂薄,当然干燥后,油镜不雅察,在淡紫灰色配景的映衬下,菌体为白色,菌体内的芽孢为红色。
五、执行陈说
1.成果
画图暗意你不雅察到的两种芽孢杆菌的芽孢在形势、大小、着生位置上有什么不同?
2.念念考题
为什么在孔雀绿染色液加热染色中av网站大全,要待玻片冷却后智商用水冲洗?